白腐菌（t.pubescensmb89）漆酶的固定化及其酶学性质研究

【目的】研究白腐菌t.pubescensmb89漆酶固定化处理的最佳条件及其酶学性质。【方法】采用壳聚糖、壳聚糖铜、海藻酸钠/壳聚糖和teos/peg4种载体对漆酶进行固定，测定固定化漆酶酶活性在不同温度、ph值和固定化条件处理下的变化。【结果】白腐菌漆酶的固定化方法和最佳固定条件为：①壳聚糖固定化漆酶(ie1)。戊二醛最佳浓度为0.4mol/l，最适交联时间8h，最佳给酶量1.5mg/g；②壳聚糖铜固定化漆酶(ie2)。cuso4·5h2o最佳添加量为0.6mg/g，最适络合时间10h，最佳给酶量0.25mg/g；③海藻酸钠/壳聚糖固定化漆酶(ie3)。0.2mol/l海藻酸钠，0.2mol/lcacl2，0.1mol/l戊二醛，0.15mol/l壳聚糖,最佳给酶量1.5mg/g；④teos/peg固定化漆酶(ie4)。最适peg分子质量为600～800，最适添加量1.5g/g，最佳给酶量1.5mg/g。4种固定化漆酶的酶学性质:ie1和ie4的最适温度均为60℃，ie2和ie3为30℃；ie1、ie3和ie4的最适ph值为4.5，ie2为4.0；与游离漆酶（lac）的最适ph值相比，固定化漆酶的最适ph值均向碱性方向偏移，且固定化漆酶的酸碱稳定性、热稳定性和贮存稳定性均优于游离漆酶。【结论】固定化酶的最适合温度、ph均受固定化载体和方法的影响，固定化漆酶的稳定性均优于游离漆酶。