兔出血症病毒感染性cdna真核表达载体的构建与鉴定

【目的】构建操作更简便的兔出血症病毒（rhdv）感染性cdna真核表达载体。【方法】在前期构建的rhdv感染性克隆基础上，将其全长cdna分子分为3段，利用单一的限制性内切酶将其依次克隆至真核表达载体pcdna3.1(+)上，构建rhdv感染性cdna真核表达质粒，将该质粒转染bhk-21细胞，传3代后，对产生明显细胞病变的细胞冻融液进行rt-pcr检测。【结果】rhdv感染性cdna真核表达载体构建成功。构建质粒转染的bhk-21细胞出现明显细胞病变，rt-pcr检测结果表明，rhdv拯救成功。【结论】利用真核表达载体可以很方便地拯救出rhdv。