猪圆环病毒2型orf5编码非结构蛋白的表达

[目的]探讨猪圆环病毒2型(pcv-2)中orf5所编码非结构蛋白(ns)的功能.[方法]根据genbank已发表pcv-2基因组序列设计特异引物,分别以hz0201株(ay188355)、美国98-15237株病毒dna为模板,采用pcr法扩增pcv-2orf5基因,并构建了pgex-4t-1-orf5原核表达载体和pegfp-c2-orf5真核表达载体,对orf5重组蛋白进行sds-page电泳、westernblot分析,用真核表达载体pegfp-c2-orf5转染pcv-2易感细胞pk-15.[结果]pcv-2orf5基因长162bp,编码54个氨基酸;其所编码蛋白在e.coli中以包涵体形式存在,分子质量大小约为32ku.[结论]pcv-2orf5编码重组蛋白在真核pk-15细胞中成功表达.