基因工程蛋白金葡菌α-溶血素的纯化及活性检测

[目的]分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素(α-hemolysin,α-hl)并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础.[方法]对含pet32a+-α-hl质粒的bl21(de3)进行诱导表达,诱导成功后,将重组菌bl21(de3)培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活.[结果]纯化产物在sds-page电泳中53ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度.纯化产物含量约为0.1277mg/ml,溶血比活为8192hu/mg.[结论]成功获得了金黄色葡萄球菌α-hl,且所获的α-hl具有良好的溶血活性.