聚乙二醇修饰蛋白的快速分离与纯化

[目的]建立聚乙二醇修饰蛋白的快速分离纯化方法.[方法]以4种聚乙二醇化药用蛋白为研究对象,采用阳离子交换树脂进行纯化.纯化条件:hiprep16/10cmsepharoseff(1ml)预装柱;流动相:a液为20mmol/lph4.0的醋酸缓冲液;b液为a液中加入1mol/lnacl;b液以0～100%离子强度线性梯度洗脱100min,流速0.2ml/min,波长280nm检测,收集各洗脱峰.[结果]一步纯化可将单点修饰产物与聚乙二醇、多点修饰产物以及未修饰蛋白分离开来,单点修饰产物经sds-page检测呈单一条带,经质谱检测其相对分子质量与预期相符.[结论]所建立的纯化方法可快速分离纯化聚乙二醇修饰蛋白.