prrsvhn-08株的分离鉴定及其部分生物学特性研究

[目的]对2008年河南省猪呼吸与繁殖综合征病毒(prrsv)流行株进行分离鉴定,并对其生物学特性进行研究,以了解免疫猪群发病的原因.[方法]从河南省猪场采集发病猪的血清和组织,采用marc-145细胞对其中的prrsv进行分离及初步鉴定.应用rt-pcr法对分离株进行扩增,并构建克隆载体,对阳性质粒测序后进行orf5基因核苷酸及推导氨基酸序列分析,同时对分离毒株进行非免疫猪人工感染试验,确定其致病性.[结果]从发病猪组织和血清中分离到1株prrsv(hn-08株),其可引起marc-145细胞产生细胞病变(cpe),可在marc-145细胞中稳定传代,能被prrsv高免血清特异性中和;从人工感染发病猪组织和血清中均分离到prrsv.rt-pcr得到与预期大小相符的特异片段,提交ncbi鉴定为hn-08株,属美洲型prrsv.[结论]从河南省发病猪体内分离的hn-08株属美洲型prrsv,对猪具有很强的致病力,可引起marc-145细胞产生cpe,病毒滴度tcid50为105.1/ml.