葡萄悬浮细胞系的建立

[目的]建立适合葡萄悬浮细胞系快速稳定生长的培养体系.[方法]以鲜食葡萄巨峰的果皮为材料,以b5为基本培养基,通过选择合适的激素配比及浓度、ph、蔗糖浓度等建立并优化葡萄愈伤组织培养体系及细胞悬浮培养体系.[结果]在b5+0.5mg/l6-ba+naa条件下,naa最适质量浓度为1mg/l;在b5+0.5mg/l6-ba+2,4-d条件下,2,4-d最适质量浓度为1.0～2.0mg/l;在b5+1mg/lnaa+6-ba条件下,6-ba最适质量浓度为0.5～1.0mg/l,在b5+2mg/l2,4-d+kt条件下,kt的最适质量浓度0.2mg/l.在最佳蔗糖质量浓度30g/l、最适ph5.5～5.8培养基条件下,建立了能快速生长的均一、稳定的巨峰葡萄细胞悬浮体系,优化了培养条件.[结论]适合葡萄愈伤组织生长的培养体系为:b5+250mg/l水解酪蛋白+0.1mg/lnaa+0.2mg/lkt+30g/l蔗糖+6g/l琼脂;适合葡萄细胞悬浮培养的体系为:b5+1mg/lnaa+0.5mg/l6-ba+30g/l蔗糖和b5+250mg/l水解酪蛋白+0.1mg/lnaa+0.2mg/lkt+30g/l蔗糖.