小鼠皮肤成纤维细胞与早期胚胎共生体系的构建

[目的]构建小鼠早期胚胎与皮肤成纤维细胞共生的微环境体系.[方法]分离培养egfp纯合阳性成年icr小鼠皮肤成纤维细胞.取激素超排合笼后2.5d小鼠8-细胞胚胎,通过显微操作系统将4～6个egfp阳性小鼠皮肤成纤维细胞注射到小鼠早期8-细胞胚胎中,转移发育到囊胚阶段的共生胚胎至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,在小鼠胚胎干细胞分离培养条件下进行培养.[结果]egfp阳性小鼠成纤维细胞注射到小鼠胚胎后,荧光显微镜下显示,egfp阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚组成细胞中,参与小鼠囊胚组成.在发育到囊胚的共生胚胎中,egfp阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚细胞中的比例为93.73%(269/287).在小鼠胚胎干细胞的分离培养条件下,2.60%(7/269)共生胚胎中egfp阳性小鼠成纤维细胞参与小鼠胚胎内细胞团的组成.[结论]小鼠皮肤成纤维细胞与小鼠早期胚胎能够形成共生的微环境体系.