鸭副粘病毒病rt-pcr诊断方法的建立与应用

【目的】建立快速、准确检测鸭副粘病毒病的方法。【方法】根据genbank中发表的新城疫f基因序列设计1对引物，扩增鸭副粘病毒融合蛋白基因727bp的特异性片段，进行特异性试验和敏感性试验，建立了鸭副粘病毒病的rt-pcr诊断方法。应用建立的诊断方法，对从山东不同地区分离的20株疑似鸭副粘病毒毒株和150份疑似感染副粘病毒鸭的病变组织进行了检测。【结果】特异性试验表明，建立的rt-pcr检测方法能够从鸭副粘病毒sdfch株中扩增到727bp的特异性片段，而对鸭瘟病毒、h9n2亚型禽流感病毒、鸭肝炎病毒的扩增结果均为阴性；敏感性试验表明，该法最低检出量的cdna质量浓度为3pg/μl；山东不同地区20株疑似鸭副粘病毒分离株中有15份为阳性；150份疑似感染副粘病毒鸭的病变组织有125例为阳性。【结论】建立的鸭副粘病毒病的rt-pcr诊断方法，且有快速、准确、特异性强、敏感性高的特点。