银中杨dreb基因的克隆及表达

【目的】克隆银中杨抗逆转录因子dreb基因，为其功能的深入研究奠定基础。【方法】根据drebap2/erebp保守区设计1对简并引物，采用pcr方法对银中杨（populusalbaxp）转录因子dreb基因中间片段进行克隆；再利用反向pcr方法对该基因的旁侧序列进行克隆，最终将两侧序列与中间片段拼接得到基因全长；同时，根据基因序-列设计1对特异引物，利用荧光定量pcr分析银中杨dreb基因在不同逆境胁迫中的表达情况。【结果】成功地从银中杨中克隆到1个dreb基因，命名为padreb（注册号：ef582843）。该基因序列长935bp，orf为819bp，编码272个氨基酸；同源性比较与系统发育分析证实，银中杨dreb属于dreb转录因子家族，并与月季dreb2c具有较高的同源性；荧光定量pcr检测结果显示，盐、低温、干旱及aba均能诱导dreb基因的表达。【结论】首次从银中杨中分离并克隆了dreb基因，并证实其参与了银中杨对盐、低温、干旱及aba的应答。