灵芝多糖的提取纯化及其免疫活性

【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖，研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响，为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖，经反复冻融、sevag法脱蛋白和sepharosecl-6b柱层析，纯化得灵芝多糖(glp)。通过hplc鉴定glp的纯度，g.c.分析其单糖组成。采用mtt法、中性红试验、griess法、比色法和elisa法，分别检测glp对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、no产量和inos活性以及tnf-α产量的影响。【结果】glp为白色粉末，分子质量为51ku，hplc分析glp为单一狭窄对称峰，其单糖组成为葡萄糖(glc)和半乳糖(gal)，二者物质的量之比为16.8∶1。glp能够刺激小鼠t淋巴细胞增殖，并呈现剂量依赖关系；当glp质量浓度达到100μg/ml时，能显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力，提高其分泌inos的活力和no的生产量；同时，当glp质量浓度≥200μg/ml时，能显著促进腹腔巨噬细胞分泌tnf-α的能力，具有剂量依赖性。【结论】glp能够增强小鼠免疫细胞活性，有望成为重要的生物免疫调节剂。