小麦5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化及部分性质研究

以30%～60%硫酸铵饱和度分级沉淀、deaesepharosecl-6b、sephadexg-200、phenylsepharosecl-4b和羟基磷灰石层析纯化了小麦5-氨基酮戊酸脱水酶(alad),其在ph8.5时比活为31u·mg-1蛋白;酶纯化了91倍,得率5%,酶亚基分子质量约52ku,全酶分子质量约330ku,表明酶由6个亚基组成;酶的等电点为4.8,在400nm有吸收峰,最适反应温度45℃,mg2+激活酶,zn2+和磷酸吡哆醛抑制酶。纯化的alad浓缩后,-20℃下在0.1mol·l-1,ph8.5的tris-hcl,内含50%的甘油,5mmol·l-1的巯基乙醇和mgcl2中黑暗贮藏30d酶活不损失。