落叶松-杨栅锈菌dna提取新方法研究

对提取dna“二球法”的一些步骤和提取成分进行了更新，使得pcr反膻灵敏性显著增加。改进的内容包括：（1）在有二钢珠和1.6g/lchelex的离心管中加入夏孢子，夏孢子可以来自带有风十寄主叶肉组织的夏孢子堆；（2）在离心管中加入koh而不是naoh，然后剧烈斡旋30min；（3）将离心管管底穿一小孔，套上一新离心管，短暂离心甩出内容物。用该方法得到的dna可用作its-nrdna-pcr，rapd和ssr的底物。同时，分析了pcr扩增中提取上液的稀释倍数，发现rapd和ssr扩增稀释倍数达到16倍以上有较好的反应结果。