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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2005
胃泌素rt-pcr方法的建立及同源性分析Abstract: 从猪胃窦和十二指肠提取总rna,采用美国ambionrna公司生产的quantumrnaclassic18s为内标,建立了半定量rt-pcr方法,并对胃窦和十二指肠胃泌素mrna进行了定量检测、测序和比较分析。结果表明,扩增的猪胃窦和十二指肠胃泌素核苷酸序列与猪前胃泌素(propregastrin)核苷酸的同源性达到99%。将其与已发表的人、牛、大鼠和小鼠等物种相应序列的比较结果表明,无论是核苷酸水平,还是氨基酸水平,都显示出了较高的同源性(80%~99%)。另外,建立的rt-pcr方法灵敏度高,操作快捷方便,可用于定量检测少量的组织样品中低丰度表达的胃泌素mrna。
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