榕属植物基因组dna的提取及rapd体系的优化

以桑科榕属植物为研究对象,利用改进的ctab法提取基因组dna,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了模板、mg2+、taq酶、dntps和随机引物的浓度及用量,建立了榕属植物rapd技术分析体系。反应体系总体积为25μl,各组分浓度为:10×buffer2.5μl,mg2+2.5mmol/l,taqdnapolymerase0.06u/μl,dntps0.2mmol/l,primer0.2μmol/l．templatedna1.2ng/μl。pcr循环程序为:94℃预变性4min;94℃循环变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min,40个循环;最后72℃延伸8min。