毕赤酵母工程菌原果胶酶的分离纯化

采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法，对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化，测定了其分子质量，并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明，硫酸铵的饱和度为70％时，可以使原果胶酶的回收率达到71．9％，比活力为1096．35u/mg；经sephadexg75凝胶过滤，原果胶酶回收率达到57．6％，酶的比活力提高到3762．40u/mg；最佳离子交换条件为：0～0．5mol/lnacl（缓冲休系为noac—hac，ph5．8）溶液线性洗脱、sepharosefastflow离子交换层析分离．在该条件下酶的比活力提高到9743．20u/mg，纯度为粗酶液的18．91倍。达到了电泳级；sds-page电泳结果表明，其分子质量为43．17ku。