鲫鱼淋巴细胞转化pha刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用rpmi-1640培养基培养48h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohemagglutinin,pha)(0μg/ml、80μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml、1200μg/ml)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在pha浓度0~400μg/ml的范围内,随着pha浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当pha的浓度增加到1200μg/ml,淋巴细胞转化率明显下降。其中pha浓度为400μg/ml时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组(80μg/ml)和高浓度组(1000μg/ml、1200μg/ml)(p<0.05),略高于中浓度组(200μg/ml、600μg/ml、800μg/ml),差异不显著(p>0.05)。由此可见,在本试验条件下,pha体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400μg/ml。(2)用流式细胞仪检测细胞内dna合成情况,multicycleav软件进...