黄鳝藤黄微球菌的分离鉴定及药敏试验

为探讨黄鳝(monopterusalbus)出血病病原菌的种类及耐药情况，采用动物回归和细菌常规分类鉴定方法及16srdna基因系统发育学分析等手段，从四川名山地区黄鳝出血病病料中分离到具有致病性的菌株(hm1)，经人工感染实验证实该菌为黄鳝出血病的病原菌。动物致病性试验显示，该分离株对泥鳅和小白鼠不致病，对云斑有较弱的致病力。对该分离株的形态和生理生化指标进行分析，试验结果与报道的藤黄微球菌一致，为革兰氏阳性、球菌，无运动力，多成双、四联或簇状排列，不形成链状排列，不形成芽孢；接触酶和明胶液化阳性；乳糖、甘露醇、葡萄糖、七叶苷、硝酸盐还原、精氨酸双水解阴性等特征。采用细菌16srdna基因通用引物对该菌的16srdna基因进行pcr扩增、克隆测序，得到1条长度为1382bp的核苷酸序列(genbank登录号为：hm044913)。该序列经rdp(ribosomaldatabaseproject)数据库在线classifer分析，结果表明该菌株属于微球菌属细菌。以该菌16srdna序列和genbank数据库内同源性较高的细菌16srdna序列进行同源性比对分析和构建系统发育树，结果显示分离菌(hm1)与微球菌属的藤黄微球菌菌株的同源性高达99%,且在系统发育树上与其他不同来源的藤黄微球菌聚为一支。结合形态及生理生化特点将其确定为藤黄微球菌(micrococcusluteus)。24种药物的药敏试验结果显示，该分离株对诺氟沙星、头孢唑啉、羧苄西林等18种药物敏感；对复达欣中度敏感；但对萘啶酸、加替沙星、磺胺异恶唑等5种药物耐药。