原生质体融合选育耐高温耐盐红螺菌的研究

为选育耐高温耐盐红螺菌用于其粉状制剂研制，以降解水产养殖水体亚硝基氮功能达90%以上的耐盐红螺菌与能在60～70℃下生长的嗜热脂肪芽孢杆菌为出发菌株，通过正交试验探讨2种菌株的原生质体融合条件。分别对融合子进行温度、生长盐度和净化水质等功能测定，检出性能较优的融合子，同时采用电镜、细胞色素吸收光谱等方法，将融合子优良株与2种亲株进行比较鉴别。实验结果表明，2种菌株原生质体融合的最优条件为温度37℃，作用时间3h，聚乙二醇（peg）浓度为40%。在该优化条件下原生质体融合率为1.536%，筛选获得3株能在30～50℃良好生长的融合子（a、b、c）。融合子生长耐受温度较耐盐红螺菌亲株提高66%，但耐受盐度、降解养殖水体氨氮与亚硝基氮功能均与耐盐红螺菌亲株相近。其中融合子a菌株具有生长更快、性能更稳定的特点，其细胞形态特征、革兰氏染色属性、色素吸收峰等均与耐盐红螺菌相似。