南极独角雪冰鱼hsp90β基因cdna序列克隆及其原核表达

为研究南极鱼类hsp90β蛋白与低温适应的相关性,本研究克隆获得了南极独角雪冰鱼(chionodracohamatus,ch)热休克蛋白hsp90β基因的完整开放阅读框,并以尼罗罗非鱼(oreochromisniloticus,on)hsp90β蛋白为对照,进行低温胁迫下的原核表达研究。结果表明:克隆获得的独角雪冰鱼hsp90β基因编码区全长为2184bp,推定编码728个氨基酸。多重序列比对显示,独角雪冰鱼hsp90β与其他鱼类hsp90β的氨基酸序列同源性在87%以上;蛋白结构域分析发现,独角雪冰鱼hsp90β具有hsp90家族的保守信号区,其重要功能位点的氨基酸残基非常保守。构建pet28-ch-hsp90β和pet28-on-hsp90β重组表达载体,观察4℃低温胁迫8h和12h后,hsp90β蛋白对大肠杆菌生存能力的影响。结果显示:c.hamatus-hsp90β组的大肠杆菌存活率显著高于o.niloticus-hsp90β组和空载体pet28a对照组,这表明南极冰鱼hsp90β在低温条件下具有更加显著的细胞保护功能。由此推测hsp90β蛋白参与了南极冰鱼低温适应的生理过程。