南极磷虾体内胰蛋白酶的纯化及性质研究

以南极磷虾（euphausiasuperb）为研究对象，通过硫酸铵分级沉淀、phenyl-sepharose疏水层析、deae-sepharoseff离子交换层析等方法，从南极磷虾体内分离纯化出胰蛋白酶。其纯化倍数为5.44倍，比活力为38.3u/mg，得率为26%。sds-page电泳结果显示，该酶的分子质量为28ku。蛋白酶最适温度为37℃、最适ph为7.5，mg2+、ca2+、mn2+对南极磷虾蛋白酶具有激活性，zn2+、cu2+、fe3+具有酶活抑制性，其中cu2+的抑制性最强。酶的动力学实验结果表明，以bapna为底物测得km为0.073mmol/l，vmax为1.44×10-2mmol/l·s，kcat为0.6s-1，kcat/km为8.22×103，pmsf作为蛋白酶抑制剂，对南极磷虾蛋白酶作用机制为不可逆抑制。