锯缘青蟹呼肠孤病毒p40蛋白的体外表达与单克隆抗体制备

锯缘青蟹呼肠孤病毒（scyllaserratareovirus，ssrv）第9节段（s9）编码的p40蛋白可能为病毒的甲基转移酶（methyltransferase）。为了便于确认p40在病毒复制过程中扮演的角色，将s9片段的开放阅读框（orf）克隆到原核表达载体pet28a（+），实现了在宿主表达菌e.colibl21（de3）中的高效表达，进而纯化了重组表达蛋白p40（rp40），并制备了抗ssrvp40蛋白的2株单克隆抗体（4b7、3e5）。经westernblot分析表明，2株单克隆抗体均可特异地识别rp40蛋白，以及识别ssrv病毒蛋白中分子量为46ku和40ku2条蛋白条带。实验结果不但确认ssrvp40为ssrv的结构蛋白，也提示p40和p46蛋白可能具有相同的抗原表位。为该蛋白的后续功能研究奠定了基础。