|
上海海洋大学学报 2014
piggybac转座元件的构建及其在团头鲂基因组中的转基因效率, PP. 161-166 Keywords: piggybac转座子,团头鲂,转基因 Abstract: 鳞翅目昆虫粉纹夜蛾(trichoplusiani)的piggybac(pb)转座子已用于模式生物小鼠的转基因及插入诱变研究,目前,该转座子在养殖鱼类中的转基因效率如何还不清楚。构建了带piggybac转座子左臂、右臂、ef1α启动子和绿色荧光蛋白(egfp)编码框的ppbs-ef1α-egfp供体质粒。以50ng/μl供体质粒和100ng/μl体外转录的pb转座酶mrna共同显微注射入团头鲂(megalobramaamblycephala)1~2细胞期受精卵中,团头鲂egfp的荧光表达率可达58.26%,pcr检测结果显示,该转座系统在团头鲂成鱼基因组中的整合效率为53.04%。表明piggybac转座子可高效介导基因在团头鲂基因组中的插入,为进一步开展团头鲂插入诱变研究奠定了基础。
|