tgf2转座子介导鲤fst1基因元件在鲤中的转基因效率研究

卵泡抑素（follistatin，fst）蛋白具有拮抗tgf-β超家族许多成员的功能，通过直接的蛋白结合可抑制肌肉抑制素（myostatin）的活性，从而恢复肌肉的生长，表现出增肌效应。参照鲤高通量转录组测序数据的拼接结果，筛选出鲤卵泡抑素fst1基因的编码框（orf）序列（全长1260bp，编码320个氨基酸），构建了包含金鱼tgf2转座子左臂（220bp）、右臂（185bp）、斑马鱼mylz2启动子和鲤fst1基因orf的供体质粒ptgf2-mylz2-ccfst1。通过显微注射方法，并在体外合成的tgf2转座酶5’加帽mrna的介导下，获得了一批转鲤fst1基因的转基因鲤。经pcr检测，转基因鲤fst1外源基因的整合率平均为44.7%，对其中4尾转基因阳性鲤的扩增产物进行回收、克隆和测序验证，结果表明阳性鲤中均含有转基因目的片段。说明tgf2转座子转基因系统可在鲤中实现较高的转座效率，为进一步研究卵泡抑素在鲤肌肉发育中的功能奠定了基础。