一种定量检测人血清高敏c反应蛋白的化学发光免疫方法

旨在建立一种可定量检测人血清高敏crp的化学发光检测方法(high-sensitivityc-reactiveproteinquantifiablechemiluminescentimmunoassay，hs-crpclia)。首先利用亲和层析和离子交换层析技术从肝硬化病人腹水中纯化出高纯度的天然crp作为免疫原制备了22株crp单克隆抗体(单抗)，其中13株单抗在磷酸胆碱配体捕获elisa中呈阳性，然后利用方正滴定法筛选出单抗10c5和10c11建立了hs-crpclia。试剂盒评估结果显示：该方法对血清中干扰物质igg、血红蛋白、甘油三酯等无非特异性反应；该方法检测灵敏度高，在0.04~20.38mg/l范围内定量检测人血清crp标准品呈良好线性关系(r2＞0.993)；该方法准确性高、可重复性好，平均回收率为99％，批内差为4.2％~5.8％，批间差为9.0％~11.5％；该方法与进口商品化高敏crpelisa试剂盒平行比较检测90份血清标本，结果显示两者有良好的可比性(r=0.968)。综上，建立的hs-crpclia是一种准确、可靠、可定量的高灵敏c反应蛋白检测方法，该方法的临床应用，有利于改善我国心脏病风险评估及肠炎性疾病预后判断。