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生物工程学报 2010
dna聚合酶δ结合蛋白38是microrna-291a-5p的一个靶基因, PP. 1095-1101 Keywords: microrna,mir-291a-5p,pdip38,胚胎干细胞 Abstract: dna聚合酶δ结合蛋白38(dnapolymerasedelta-interactingprotein38,pdip38)是2003年新鉴定的一个基因,目前认为其可能在dna修复、有丝分裂以及血管平滑肌细胞迁移中起重要作用。根据本实验室前期在胚胎干细胞中对该基因的研究,认为microrna可能在pdip38的调控过程中发挥了重要作用。为证实这种推论,运用生物信息学方法预测发现在胚胎干细胞中高表达的microrna——microrna-291a-5p(mir-291a-5p)与pdip38的开放阅读框(orf)有一个配对非常理想的靶位点,通过构建该靶位点的报告基因载体以及orf表达载体,分别进行荧光素酶报告基因分析以及细胞转染和westernblotting方法。结果证明mir-291a-5p能够直接调节pdip38的蛋白表达。进一步运用real-timepcr和westernblotting分析证明了在胚胎干细胞中mir-291a-5p能够调节内源pdip38的蛋白表达而对其mrna表达无影响,这些都证明pdip38确实是mir-291a-5p的一个靶基因。
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