白藜芦醇对猪前体脂肪细胞凋亡的作用及机理

旨在研究白藜芦醇对猪前体脂肪细胞凋亡的作用，探讨其分子机制。以50μmol/l、100μmol/l、200μmol/l、400μmol/l白藜芦醇处理猪前体脂肪细胞，采用hoechst33258染色剂染色，光学和荧光显微镜分别观察细胞的形态学变化。semi-qrt-pcr和westernblotting方法检测凋亡相关基因sirt1、caspase-3、bcl-2、bax、p53、nf-κb的mrna和蛋白的表达变化。结果表明，白藜芦醇处理后，前体脂肪细胞出现明显的细胞凋亡，伴随细胞体积缩小，染色质凝集，核质固缩等特征显现，与对照组相比200μmol/l处理组细胞的凋亡率显著升高(p＜0.05)。凋亡相关基因sirt1、caspase-3和bax的mrna和蛋白表达水平显著上调(p＜0.05)，而bcl-2、p53、nf-κb等基因的表达水平明显下调(p＜0.05)。进一步证实白藜芦醇特异性地增加sirt1的表达活性，而sirt1的上调影响caspase-3和bcl-2家族因子的活性，同时参与调控p53和nf-κb的转录表达。因此，推测sirt1调控凋亡相关因子表达是白藜芦醇诱导前体脂肪细胞凋亡的关键原因。