大肠杆菌脯氨酸基因的体内克隆及表达

用含mini－mu的多拷贝质粒peg5005体内克隆了大肠杆菌脯氨酸基因proa+b+，其pr0＋克隆频率为1．46×1o-3／kanr转导子。遗传和生化分析表明这些克隆的pr0＋基团位于质粒上，用生长谱法对若干克隆子作了脯氨酸产量测定，但未检测出脯氨酸的积累。通过细胞内诱变pro＋克隆ppr3获得的去反馈抑制突变质粒ppr7，在脯氨酸pr0ab基因缺失的寄主中可积累0．35mg／ml的脯氨酸，将此克隆转移至产1mg／ml脑氨酸的受体菌，其产酸量达2．5mg／ml，比受体高2．5倍，比供体提高了7倍，文中还对peg5005和克隆ppr3作了内切酶分析。