利用tn5定位诱变筛选紫云英根瘤菌exo-变种

利用tn5定位诱变方法，对质粒pjb-b5进行tn5插入诱变，得到10个tn5在5.9kbb5外源片段上有不同插入位点的质粒tn1-1,tn1-12,tn2-2,tn2-3,tn3-1，tn4-1,tn9-|1,tn10-1,tn13-1,tn14-1。将tn1-1等分别转移到已经含有不相容质粒pph1ji的紫云英根瘤菌107菌株中，使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别，筛选到3株菌落表型干燥(muc-)的酸性胞外多糖(eps)合成缺陷菌株(exo-)107(tn2-2),107(tn10-1),107(tn13-1)\.southern杂交分析证明这3株变种的tn5插入确实是同源交换而不是转座产生，表明经过适当改良的tn5定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌exo-变种的筛选。