胞浆内精子注射技术生产小鼠

以piezo操作系统为技术支撑,在掌握小鼠卵母细胞胞浆内精子注射技术(icsi)的基础上,进行了icsi技术生产试管小鼠的尝试。来自成年昆明(km)小鼠附睾尾的新鲜精子,剪切去尾后,直接将精子头注射到b6d2f1小鼠卵母细胞质中,注射后1h,83.3%的卵母细胞存活。6h时,84.0%的成活卵子成功受精,形成原核,排出pb2体外培养的icsi胚胎,卵裂率(98%vs94.7%)和4-细胞期胚胎比率(89.5%vs92.1%)均与培养的体内受精卵没有差异(p>0.05);但是,桑椹胚(63.8%vs84.2%)和囊胚发育率(25.7%vs68.4%)极显著地(p<0.01)低于对照组。120枚原核期胚胎移植给7只假孕受体后,4只受孕小鼠共产出28只icsi小鼠(23.3%)。健康成年的25只icsi小鼠都没有明显的生理和行为异常。随机选择其中的20只小鼠,分别进行icsi小鼠间、icsi与km小鼠间共12组的交配,结果所有雌鼠妊娠产仔。在成功建立小鼠icsi技术的基础上，成功获得了我国的首例icsi小鼠，并且证明这些icsi小鼠都具有正常的繁殖后代的能力。