|
生物工程学报 2005
蛋白激酶cδ的克隆表达纯化及其在药物先导化合物筛选中的初步应用Abstract: 蛋白激酶c家族是一类磷脂酰丝氨酸依赖丝氨酸苏氨酸蛋白激酶。pkcδ(蛋白激酶cδ)是蛋白激酶c家族成员。pkcδ的异常激活将会导致糖尿病和多种癌症的发生,因此,pkcδ的特异性抑制剂能成为治疗这些疾病的潜在药物,如能以pkcδ为分子靶点来筛选特异性抑制剂,就可以建立癌症及糖尿病的药物先导化合物筛选模型。通过rt-pcr的方法,克隆了鼠源的pkcδ,并构建了哺乳动物细胞表达载体,获得了可稳定表达pkcδ的cos1细胞株。通过亲和吸附的方法获得了较为纯净的pkcδ,并对酶学活性作了进一步的分析,建立了以pkcδ为靶点的药物先导化合物筛选模型。
|