根霉12#发酵产生纤溶酶的酶学性质

溶栓疗法是血栓性疾病安全有效的治疗手段,开发新型纤溶酶具有实际应用意义。分离自南方小酒药的根霉12#以豆粕和麸皮为原料可产生纤溶酶。已采用盐析,疏水层析、离子交换层析和凝胶层析方法对纤溶酶分离提纯。提纯的纤溶酶比活力2143u/mg(尿激酶单位),有直接溶解血栓和激活纤溶酶原的双重溶栓作用,降解纤维蛋白α、β和γ肽链速度快;最适作用温度45℃,适宜作用ph范围6.8～8.8;等电聚焦方法测定该酶等电点8.5±0.1;只分解生色底物n-succinyl-ala-ala-pro-phe-pna,其米氏常数km为0.23mmol/l,酶转换数kcat为16.36s-1;molish实验和甲苯胺蓝实验均证明该酶为糖蛋白,地衣酚_硫酸法测得该酶含糖量470%;edta、pmsf、pcmb对该纤溶酶有抑制作用,说明活性中心含有巯基、金属和丝氨酸;n端12个氨基酸序列为nh2-ser-val-ser-glu-ile-gln-leu-met-his-asn-leu-gly,与其它生物来源的纤溶酶相比较没有同源性。根霉12#产生的纤溶酶为新型纤溶酶，有希望开发成溶栓药物。