口蹄疫病毒p1基因在大肠杆菌中的高效表达及其生物活性的初步分析

将口蹄疫病毒(fmdv)结构蛋白基因p1的完整cdna序列插入原核表达性载体pgexkg中,使p1基因与gst融合,获得融合表达质粒pkgp1,转化e.colibl21(de3),经iptg诱导,sdspade结果表明gstp1融合蛋白获得高效表达,westernblot检测证实表达的融合蛋白具有免疫学活性,表达产物主要存在于细菌裂解液上清中。进一步采用gst纯化试剂盒纯化p1蛋白并作为诊断抗原,建立了p1elisa诊断方法,与fmd间接血凝(iha)检测方法平行检测864份血清样品,总的符合率达87%。