鸡卵清蛋白基因启动子调控gfp基因在鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞的表达

特异性扩增家鸡卵清蛋白基因上游调控序列1340bp～+1655bp片段和第一内含子+49bp～+1655bp片段,去除pgfpn2载体自身的cmv启动子,分别构建了p2.9kovalgfp和p1.5kovalgfp两种表达载体,经测序和酶切鉴定表达载体构建正确。采用脂质体转染法分别将这两种载体、pgfpn2(阳性对照)质粒及阴性对照转染鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞。用荧光倒置显微镜观测绿色荧光蛋白的表达。结果表明:两种表达质粒在鸡原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞中都可以表达荧光蛋白。结果既显示卵清蛋白第一内含子对基因的表达起到一定的调控作用,也显示卵清蛋白启动子对输卵管上皮细胞和卵巢细胞不存在特异性,并且不存在种属差异性。