抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定

根据转铁蛋白受体和转铁蛋白特异性结合的性质，利用亲和纯化的方法从胎盘中提取转铁蛋白受体。以转铁蛋白受体为抗原包被免疫管，从全合成人源噬菌体单链抗体库中筛选其抗体。对筛选到的抗体进行特异性鉴定后，将抗体基因插入表达载体pet22b(+)，转化大肠杆菌bl21(de3)，iptg诱导后获得可溶性表达。hela细胞的免疫组化结果显示，表达的抗体可以与转铁蛋白受体结合。表达产物经ninta金属螯和层析柱纯化、脱咪唑后，从尾静脉注射小鼠。1h后，去除血液及毛细血管的干扰，在脑实质中检测到了抗体的存在，说明该抗体可以通过血脑屏障。