诱导相温度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素聚合的影响

研究了pichiapastoris表达重组人复合α干扰素（cifn）时诱导期温度对cifn形成聚合体的影响。在5l罐上考察毕赤酵母在不同温度（30、25、20℃）下诱导时菌体生长和cifn表达的差异，发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响，总蛋白表达量有所降低，相当于30℃发酵时胞外总蛋白的678%。但是通过非还原性电泳、nativepage及westernblotting分析发现较高温度（30℃）诱导表达时，分泌到胞外的cifn容易形成聚合体，单体含量很少。诱导相控制温度为20℃时，明显降低了cifn聚合体的形成，cifn单体量为570mg/l，发酵上清液抗病毒活性为1.05×109iu/ml。与控制诱导相温度为30℃相比，cifn单体量提高了7.2倍，发酵上清液中单位体积的cifn抗病毒活性提高了38.7倍。