共培养体系在牛核移植胚体外发育培养中的应用

采用电融合法构建牛体细胞核移植重构胚，分析共培养细胞类型、传代次数、细胞冻融以及蛋白质添加物（bff和fbs）对牛体细胞核移植胚体外发育的影响，探讨胚胎体外共培养的条件，以建立优化的共培养体系。结果表明：与非共培养组相比，共培养组重构胚的囊胚发育率以及胚胎细胞数显著增加(p<0.05)，而输卵管上皮细胞共培养组同颗粒细胞共培养组相比胚胎细胞数显著增加(p<0.05)，更适合做共培养细胞；随着共培养细胞传代次数的增加重构胚囊胚发育率及胚胎细胞数显著下降(p<0.05)，共培养细胞在冷冻处理后重构胚的囊胚率和胚胎细胞数都显著下降(p<0.05)；bff较fbs更能促进牛核移植胚的囊胚发育率(p<0.05)。表明应用新鲜原代输卵管上皮细胞进行牛核移植胚胎的共培养，并在sofaa添加10%bff能够有效促进核移植胚胎的体外发育。