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生物工程学报 2006
sspdnab蛋白质内含子介导的重组人脑钠素的制备Keywords: 多肽制备,脑钠素,蛋白质内含子,蛋白质剪接 Abstract: 脑钠素(bnp)是临床治疗代偿失调性心衰竭的有效药物。将脑钠素与组氨酸标签(his-tag)以及具有自我剪切功能的sspdnab微型蛋白质内含子进行融合表达。表达产物经ni-sepharose亲和层析及体外复性处理后,用cm-纤维素对复性产物进行了浓缩,并通过改变cm-纤维素柱内的ph及温度,诱导sspdnab微型蛋白质内含子的剪切作用,使脑钠素从融合蛋白中释放并与载体蛋白(his-dnab)分离,再经c4反相高效液相色谱法进一步纯化后,从每升培养液中获得了2.8mg纯度达97%的重组人脑钠素。体外活性测定结果表明,重组人脑钠素对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应,其ec50为1.94×10-6mg/ml。
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