毕赤酵母表达hwtx-ⅰ的不均一性分析

为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-ⅰ（hwtx-ⅰ）时产生不均一性表达产物的原因，应用阳离子交换层析、反相hplc、tricinesds_page电泳、质谱等技术，对基因工程菌pichiapastorisgs115/hwtx-ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定，并对不均一产物的n端和c端进行测序，结果表明：表达产物的不均一性主要体现在重组hwtx-ⅰ的n端信号肽加工的不完全以及c末端的内部降解。生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然hwtx-ⅰ活性的30%。同时，对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策。