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生物工程学报 2006
无选择标记和载体骨干序列的xa21转基因水稻的获得Keywords: 转基因水稻,xa21,白叶枯病抗性,无选择标记,无载体骨干,双右边界t-dna载体 Abstract: 利用双右边界t-dna载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因xa21导入杂交稻重要恢复系c418中。t0代共获得27个独立转基因株系，通过田间抗性鉴定与pcr分析，有17个株系的xa21基因分子鉴定为阳性，且对白叶枯病原菌p6生理小种具有抗性。通过对17个株系的后代植株进行田间抗性鉴定，分子标记辅助选择及southern杂交分析，结果显示4个株系的t1代植株中能分离出无潮霉素标记基因的xa21转基因植株。无选择标记xa21转基因株系的获得率为15%。pcr检测还表明，这些无选择标记的xa21转基因植株不带有载体骨架序列。通过对转基因后代进一步的抗性鉴定与pcr辅助选择，获得了无选择标记和载体骨架序列的转基因xa21纯合的抗白叶枯病水稻。
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