大麦黄矮病毒gav株系orf4基因在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及亚细胞定位

根据已报道的大麦黄矮病毒gav株系(bydv-gav)相关基因序列，利用rt-pcr方法获得orf4基因。在杆状病毒-昆虫细胞系统中，成功表达了orf4和gfp（绿色荧光蛋白）的融合蛋白(gfp:orf4)，westernblot检测到目的蛋白的表达。利用激光共聚焦显微镜观察其在细胞中的积累和亚细胞分布，发现orf4基因编码的17kd蛋白（p4）能进入细胞核，并在细胞核膜上聚集。通过对orf4基因编码的p4蛋白的n端和c端缺失突变结合蛋白质的结构预测分析，鉴定出n端α螺旋结构对于p4蛋白的核膜定位是必需的。这些结果为进一步研究orf4基因在黄矮病毒gav系统侵染中的生物学功能奠定了基础。