芽胞杆菌bsd-8肌氨酸氧化酶的纯化与性质

对一株从土壤中分离到的芽胞杆菌bacillussp.bsd-8菌株所产生的热稳定性较高的肌氨酸氧化酶进行纯化，并对该酶的特性进行了研究。通过硫酸铵分级沉淀、deae-纤维素离子交换柱、toyopearl疏水层析柱和sephadexg-75分子筛层析，使酶提纯25倍，比活力达到5.3u/mg。研究了纯化后的酶的生化特性，确定了该酶的主要特性：该酶为黄素蛋白，与黄素以非共价键的方式结合，由单一亚基组成，其亚基分子量为51kda。酶的最适反应温度及ph分别为60℃与8.5。该酶在60℃及ph8.0~10.0条件下稳定。以lineveaver-burk作图法求得该酶米氏常数km值为3.1mmol/l。ag+、hg2+、sds及tween80对该酶有强抑制作用，而tween20和tritonx-100对酶活性无影响。该肌氨酸氧化酶在耐热性质上比以前所报道的肌氨酸氧化酶有很大的提高，在酶法肌酐测定应用中有明显的优势。