苏云金杆菌6－内毒素基因及3’末端缺失基因在大肠杆菌和农杆菌中的亚克隆和表达

苏云金芽孢杆菌交种bacillusthuringiensisaizawai7-29δ-内毒素基因及其3，末端缺失基因，亚克隆到质粒pucl9上，构建了pucf33和puck63重组质粒。进一步将δ-内毒素基因及其3’端缺失基因，插入到植物表达载pbl121．2质粒中，构建了pgy61和pgyck63重组质粒。．用32p标记的δ-内毒素3’末端缺失的kpnidna片段的探针，与重组质粒进行dna—dna分子杂交，结果阳性。带有全长和3’末端缺失重组质粒，转入大肠杆菌hb101和农杆菌la4404受体细胞中，其克隆子细胞抽提物，对大菜粉蝶和玉米螟幼虫均具有杀虫生物活性。结果证明δ－内毒素基因不仅能在大肠杆菌hb10l中，而且能在农杆菌la4404中表达。