|
生物工程学报 1995
甜菜坏死黄脉病毒75kda通读蛋白基因构建与表达Keywords: 甜菜坏死黄脉病毒,75kda通读蛋白基因,54kda片段.原核表达 Abstract: 利用dna重组技术,将甜菜坏死黄脉病毒(bnyvv)内蒙分离物的cp基因和54kda通读区片段拼接。构建了bnyvv75kda通读蛋白基因。序列分析表明,构建的75kda通读蛋白基因与野生型相比.只有4个核苷酸发生了改变(包括将cp基因的终止密码子tag改造为atg),相应地2个氨基酸也发生了改变。将75kda通读蛋白基因及其54kda片段分别克隆到pjw2上,构建了这两十基因的原核表达载体。sds—page和westernblotting检测结果表明,75kda通读蛋白基因在ecolibl21(de3)中经温度(42℃)诱导后除可特异地表达75kda蛋白外。还产生两种小蛋白。75kda通读蛋白基因的54kda片段只表达出37kda的蛋白。
|