地中海拟无枝菌酸菌u32中amrc/amkc基因的序列分析及在大肠杆菌中的表达

从力复霉素sv产生菌——地中海拟无枝菌酸菌(amycolatopsismediterranei)u32的硝酸盐同化基因簇的上游克隆了一个2.6kb的eco-ri—xhoidna片段并测定其序列。序列分析表明，该dna片段编码两个完整的开放阅读框架(orf)，orf2的起始密码子gtg与orf1的终止密码子tga在tg处重叠。orf1编码一个含224个氨基酸的多肽，它同放线菌中典型的应答调节蛋白包括afsq1和mtra有很高的同源性；orf2编码一个含472个氨基酸的蛋白，它同包括afsq2和mtrb在内的组氨酸激酶同源。orf1和orf2有可能构成典型的双组份信号传导系统，分别命名为amrc和amkc。在t7启动子的控制下，完整的amrc和去除子n端一个可能的跨膜区的amkc在大肠杆菌中分别得到了高效表达，表达蛋白的分子量分别为30kd和46kd，与推测蛋白的分子量一致。