枯草蛋白酶e的定点突变及其对酶性质的影响

用定点突变的方法研究s221c/p225a，n118s/s221c/p225a，d60n/s221c/p225a和q103r/s221c/p225a突变对蛋白酶活性，酯酶活性与蛋白酶活性之比的影响。结果表明：s221c/p225a突变使蛋白酶活性比枯草蛋白酶e低73000多倍，酯酶活性与蛋白酶活性之比是subtiligase的3倍；n118s/s221c/p225a突变使蛋白酶活性和酯酶活性分别比s221c/p225a突变下降3.6倍和15倍，酯酶与蛋白酶活性之比下降4倍，同时增加变体酶的热稳定性；d60n/n118s/s221c/p225a突变使蛋白酶活性比n118s/s221c/p225a突变体下降15倍，但对酯酶活性几乎没有影响，酯酶与蛋白酶活性之比增加14倍，分别是s221c/p225a突变体和subtiligase的3.3倍和10.3倍；但是，q103r/n118s/s221c/p225a突变使蛋白酶活性比n118s/s221c/p225a突变体增加5倍，酯酶活性下降55倍，酯酶与蛋白酶活性之比下降1000倍。