痘苗病毒vv16原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究

利用带有氯霉素乙酰转移酶报道基因的检测载体，从痘苗病毒基因组dna中筛选到一个增强子样片段vv16。序列分析表明，该片段长112bp，是痘苗病毒dna依赖性rna聚合酶、polya聚合酶亚单位和dna聚合酶基因rpo30的一部分，含有4个at丰富区。采用带有β-半乳糖苷酶报道基因的载体检测发现，该片段正向可以增强报道基因表达9.0倍，反向可以增强报道基因表达4.1倍。rnadotblotting实验证实，它对基因的增强活性表现在转录水平上。dna删切实验证实，5′端10bp及3′端12bp对其活性有重要调节作用，而该片段nt76～82的序列对增强子的活性至关重要。