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生物工程学报 2002
苯丙氨酸脱氨酶在乳酸乳球菌nice系统的高效表达及其实验动物研究Keywords: 苯丙酮尿症,乳酸乳球菌,nice表达系统,基因治疗 Abstract: 为构建苯丙氨酸脱氨酶的一种更新更高表达的基因工程菌,取得治疗高苯丙氨酸血症大鼠的更佳疗效。将欧芹palcdna重组到质粒pnz8048中,构建翻译融合载体和转录融合载体,分别转化乳酸乳球菌nz9000。对两种高效表达菌株的酶活性差异进行比较,观察nisin诱导的动态进程,并利用新鲜培养的p(nz8048-pal)1/nz9000工程菌进行了高苯丙氨酸血症大鼠(称pku动物模型)的治疗实验。结果表明:(1)翻译融合型菌株具有更高的酶活性;(2)当nisin的诱导时间达6h时,产物肉桂酸生成量基本达到峰值;(3)给高苯丙氨酸血症大鼠灌喂新鲜培养的p(nz8048-pal)1/nz9000工程菌(翻译融合型),观察到该工程菌能显著降低模型动物血中phe浓度,从而取得了更好的疗效。
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