丝状真菌表达分泌系统中受体菌的构建

黑曲霉糖化酶高产菌株t21经紫外诱变后,通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株076%的菌株a.nigert21-201，其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体peg法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒pgt10-vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株t21，检测在蛋白酶缺陷株aspergillusnigert21-201和原株t21中vhb的分泌表达，结果表明在a.nigert21-201中vhb表达水平显著高于原株，但northernblot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似，由此证明酸性蛋白酶缺陷对保护外源蛋白产生了显著效果。