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ISSN: 2333-9721
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重组虎纹捕鸟蛛毒素ⅰ在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化

Keywords: 重组虎纹捕鸟蛛毒素ⅰ(rhwtxⅰ),pichia,pastoris,分泌表达,分离纯化

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Abstract:

纹捕鸟蛛毒素ⅰ是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化,具有镇痛活性的肽类神经毒素。对巴氏毕赤酵母生产的重组hwtx-ⅰ进行多步纯化,首先将分泌到培养上清的rhwtx-ⅰ进行90%饱和度的(nh4)2so4沉淀,再用截留分子量3kd的滤膜脱盐,再用cm阳离子交换层析分离,最后用c18反相层析脱盐纯化,真空干燥后得到的rhwtx-ⅰ经tricinesds-page,质谱鉴定,氨基酸组成分析,n-端序列测定及活性鉴定,证明已获得高纯度的重组hwtx-ⅰ,摇瓶表达量约为80mg/l,约占总分泌量的23.6%,并对摇瓶发酵条件进行了优化,为利用基因工程方法生产hwtx-i的规模化生产及临床应用提供了证据。

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